該方法以放射免疫測(cè)定的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合原理為基礎(chǔ)。標(biāo)準(zhǔn)品和未知樣品包被管中一起溫育，抗體包被于試管底部。溫育后將管內(nèi)物質(zhì)吸出或倒出，計(jì)數(shù)。在1～60μg/dl 范圍內(nèi)，以5 個(gè)血清標(biāo)準(zhǔn)坐標(biāo)準(zhǔn)曲線，未知樣品值可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查得。整個(gè)反應(yīng)在包被管中進(jìn)行。對(duì)于血清，尿液或血漿樣本來(lái)說(shuō)，未分離樣本的稀釋，蛋白質(zhì)的變性或提取步驟是必須的。除了非提取尿皮質(zhì)醇分析外，該藥盒也可用于尿液中游離皮質(zhì)醇的測(cè)定。首先用亞甲基氯化物提取尿液中皮質(zhì)醇，將提取物的一個(gè)等份式樣在包被管中直接脫水（試驗(yàn)證明如果使用的亞甲基氯化物，不會(huì)有損于包被管）。為確保樣本中含有適當(dāng)水平的蛋白質(zhì)，向每個(gè)包被管中加入10μl 皮質(zhì)醇血清空白，其余測(cè)定過(guò)程同血清，血漿和非提取尿皮脂醇。應(yīng)監(jiān)控使用亞甲基氯化物提取尿中皮)

　　放射免疫（RIA）的優(yōu)點(diǎn)

　　放射免疫分析具有許多其它分析方法*的優(yōu)點(diǎn)。它既具有免疫反應(yīng)的高特異性，又具有放射性測(cè)量的高靈敏度，因此能準(zhǔn)確測(cè)定各種具有免疫活性的極微量的物質(zhì)。

　　⒈靈敏度高一般化學(xué)分析法的檢出極限為10～10g，而RIA通常為10ng（納克，ng）、10pg（皮克，pg），甚至10fg（飛克，fg）、10ag（阿克，ag)。

　　⒉特異性強(qiáng)由于抗原—抗體免疫反應(yīng)專一性強(qiáng)，所被測(cè)物一定是相應(yīng)的抗原。良好的特異性抗體，能識(shí)別化學(xué)結(jié)構(gòu)上非常相似的物質(zhì)，甚至能識(shí)別立體異構(gòu)體。

　　⒊應(yīng)用范圍廣據(jù)不*統(tǒng)計(jì)，目前至少已有300多種生物活性物質(zhì)已建立了RIA。它幾乎能應(yīng)用于所有激素的分析（包括多肽類和固醇類激素），還能用于各種蛋白質(zhì)、腫瘤抗原、病毒抗原、細(xì)菌抗原、寄生蟲抗原以及一些小分子物質(zhì)（如環(huán)型核苷酸等）和藥物（如毛地黃甙等）的分析，應(yīng)用范圍還在不斷擴(kuò)展。近年來(lái)由于小分子半抗原制備抗體的技術(shù)有很大的發(fā)展，有人預(yù)測(cè)幾乎所有的生物活性物質(zhì)，只要其含量不低于RIA的探測(cè)極限，都可建立適當(dāng)?shù)腞IA法。

　　⒋操作簡(jiǎn)便RIA所需試劑品種不多，可制成配套試劑盒；加樣程序簡(jiǎn)單一次能分析大量標(biāo)本，標(biāo)本用量也少；反應(yīng)時(shí)間不長(zhǎng)；測(cè)量和數(shù)據(jù)處理易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；RIA屬體外分析技術(shù)，對(duì)患者無(wú)任何輻射危害。

　　放射免疫法試劑盒有三大主要要素 :標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)品和抗體。此外 ,質(zhì)控血清也很重要 ,是否滿足質(zhì)控血清的要求是簡(jiǎn)便、直接的檢驗(yàn)試劑盒可靠性的條件。當(dāng)然 ,還有一些輔助組分 ,如分離劑、緩沖液等試劑也不能忽視。