對稱二甲基精氨酸(SDMA)是一種甲基化的精氨酸。SDMA來自于L -精氨酸殘基的核內(nèi)甲基化，在蛋白水解后釋放到細(xì)胞質(zhì)中。SDMA由腎臟排出。
幾項研究發(fā)現(xiàn)，每3只貓和每10只狗中就有1只可能在它們的一生中患上腎病。
SDMA是腎臟功能的早期生物標(biāo)志物。它與腎小球濾過率(GFR)有很好的相關(guān)性。平均而言，腎功能喪失30 - 40%的慢性腎病(CKD)患者中，SDMA增加。然而，直到75%的腎功能喪失，肌酐才會增加。獸醫(yī)檢測SDMA將比肌酐或胱抑素C測試更早地診斷慢性腎臟疾病(CKD)。
SDMA對腎功能有特異性。不受肝病、心血管疾病、炎癥、內(nèi)分泌疾病等疾病的影響。SDMA另一個令人興奮的特點(diǎn)是它也不受肌肉質(zhì)量的影響，這簡化了對瘦的老年動物，特別是貓和患有其他導(dǎo)致肌肉萎縮疾病的動物CKD的診斷和監(jiān)測。
競爭性的SDMA-ELISA試劑盒采用微孔板檢測。SDMA與微孔板的固相結(jié)合。樣品中的SDMA被酰基化，并與固相結(jié)合的SDMA競爭固定數(shù)量的兔抗SDMA抗血清結(jié)合位點(diǎn)。當(dāng)系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)時，通過洗滌去除游離抗原和游離抗原-抗血清復(fù)合物。通過抗兔/過氧化物酶檢測與固相SDMA結(jié)合的抗體。在450 nm處檢測底物TMB /過氧化物酶反應(yīng)。與固相SDMA結(jié)合的抗體量與樣品中SDMA濃度成反比。
加樣方案
樣本準(zhǔn)備
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 質(zhì)控品 | 樣本 |
標(biāo)準(zhǔn)品1-6 （μL） | 20 |
|
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質(zhì)控品1和2 （μL） |
| 20 |
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樣本（μL） |
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| 20 |
酰化緩沖液 （μL） | 20 | 20 | 20 |
平衡試劑 （μL） | 200 | 200 | 200 |
板子在定軌振蕩器上振蕩10s
酰化試劑 （μL） | 50 | 50 | 50 |
在定軌振蕩器上室溫孵育20分鐘
每樣20μL用于ELISA試驗。
ELISA加樣方案
| 標(biāo)準(zhǔn)品 | 質(zhì)控品 | 樣本 |
標(biāo)準(zhǔn)品1-6（μL） | 20 |
|
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質(zhì)控品1和2（μL） |
| 20 |
|
樣本（μL） |
|
| 20 |
抗血清（μL） | 50 | 50 | 50 |
蓋上板膜在定軌振蕩器上室溫孵育90分鐘
洗板4次，每次用300μL洗液
酶結(jié)合物（μL） | 100 | 100 | 100 |
在定軌振蕩器上室溫孵育30分鐘
洗板4次，每次用300μL洗液
底物液（μL） | 100 | 100 | 100 |
在定軌振蕩器上室溫孵育25±5分鐘
終止液（μL） | 100 | 100 | 100 |
讀取450nm波長吸光度
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