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      谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒實驗是目前應用廣酶免疫學技術方法
      更新時間:2019-01-11   點擊次數:1044次
        谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒是將抗原的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。在測定中一般要準備合理的計劃準備好試劑,ELISA試劑盒在使用前與室溫平衡,在溫育反應步驟中,能使反應微孔內的溫度能較快地達到所要求的高度,以滿足測定要求。滿足于生物化學、分子生物學 、細胞生物學、免疫學等生物實驗需求,不用于臨床診斷。
        谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒實驗操作簡單、快速、敏感性高、能定性及半微量、微量、超微量定量分析,是目前應用廣酶免疫學技術方法。
        谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒標本:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
        1)血清:
        室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
        2)血漿:
        應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
        仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
        3)尿液:
        用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
        4)細胞培養上清:
        A、檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/ 分)。仔細收集上清。
        B、檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并 放出細胞內成份。
        離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
        5)組織標本:
        切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。
        加入一定量的 PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3087轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
        谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒使用注意事項:
        1.ELISA試劑盒檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩定20分鐘左右。
        2.檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結果。
        3.實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結果更為穩定。
        4.盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數據的準確性。
        5.底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
        6.谷氨酸脫羧酶自身抗體ELISA試劑盒實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。
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