要點
1. 在阿爾及利亞小于35歲的160例T1DM患者中，ZnT8 Ab檢出率46.25%。
2. 在28例其他抗體陰性的患者中，ZnT8 Ab檢出率50%，增加ZnT8 Ab檢測后使T1DM中抗體檢出率由82.5%提升至91.25%。
3. ZnT8 Ab在≤18歲患者中檢出率和濃度水平更高。
研究表明ZnT8 Ab是1型糖尿病鑒別診斷的良好工具和重要的補充標志物。
1型糖尿病(Type 1 diabetes mellitus, T1DM)是一種慢性疾病，主要表現為胰島β細胞功能損傷導致胰島素分泌不足。T1DM占所有糖尿病類型的5%至10%，但在兒童中則是最常見的慢性疾病。2010年，歐洲大陸14歲以下的發病率為5 - 10例/10萬人。芬蘭和撒丁島的發病率最高，每年分別超過60例/10萬和40例/10萬。印度和委內瑞拉的發病率低，為0.1例/10萬/年。在阿爾及利亞，1型糖尿病的發病率為每年30例/10萬。
T1DM的特點是參與細胞免疫，具有與HLA基因相關的遺傳易感性以及存在特異性循環自身抗體[4]。自身抗體可以預測遺傳易感人群的糖尿病發病率，也可以用于1型糖尿病的鑒別診斷。1型糖尿病有不同亞型，“1A"型在疾病起始階段即存在糖尿病相關自身抗體；除免疫介導外，在年輕患者中出現其他形式的胰島素缺乏可根據疾病特征定義為 “1B"特發型、單基因糖尿病“MODY"型和新生兒糖尿病，對應β細胞破壞和/或功能障礙。至少一種自身抗體(GAD Ab、IA2 Ab、IAA)的存在是β細胞因自身免疫性凋亡致病的標志[6]。近年來，鋅轉運蛋白8 (ZnT8)被確定為人類1型糖尿病的一種新型自身抗原[7,8]。它由SLC30A8基因編碼，是一種胰島β細胞分泌顆粒膜蛋白[9]。由于阿爾及利亞人群中沒有ZnT8 Ab的報道，本研究的目的是評估ZnT8 Ab在阿爾及利亞小于35歲1型糖尿病患者中的檢出率，并評估ZnT8 Ab測定在1型糖尿病診斷中的重要性。
方法
患者
2014年9月至2016年6月，招募160名來自阿爾及利亞的阿爾及爾市兩家醫院的糖尿病門診和兒科的患者。
納入標準為：年齡小于35歲；和/或合并酮癥；和/或在T1DM起始時存在自身抗體和嚴重的胰島素依賴。
抗體檢測方法
抗體檢測采用商品化試劑盒。GAD Ab、ZnT8 Ab、IA-2 Ab、IAA為酶聯免疫法（ELISA）；ICA為間接免疫熒光法（IIF）。
結果
1. 患者一般特征
160例患者的一般特征見表1a和表1b。患者性別(女：男）比率為1.16，抗體測定時的中位年齡為14.09歲，糖尿病病程中位數為4.1年。
表1 160例阿爾及利亞1型糖尿病患者的一般特征
注：HbA1c糖化血紅蛋白，正常范圍4.3-5.7%；FBG空腹血糖，正常范圍0.7-1.1 g/L（3.9-6.1 mmol/L)。
2. 抗體的檢出率
在160例患者中，146例（91.25%）患者至少檢測到1種抗體陽性。14例患者（8.75%）未檢測到抗體，4例患者（2.5%）所有抗體均呈陽性。
在全部160例患者中，74例（46.25%）患者中檢測到ZnT8 Ab陽性，53.125%患者GAD Ab陽性，32.5%患者IA2 Ab陽性，31.25%患者IAA陽性，15%患者ICA陽性 。
本研究觀察到，有28/160（17.5%）的患者未檢測到GAD Ab、IA2 Ab、IAA、ICA 4項抗體，在這28例患者中，有14例（50%）檢測到ZnT8 Ab陽性。
表2 160例阿爾及利亞1型糖尿病患者ZnT8 Ab陽性和ZnT8 Ab陰性中特定抗體的檢出率
3. 自身抗體存在的相關因素
1）性別
整體抗體陽性率在性別上存在顯著差異。女性中抗體陽性率（94.16%）高于男性中抗體陽性率（75.67%；p=0.01）。對于ZnT8 Ab，女性中ZnT8 Ab陽性占比（70.3%）顯著高于男性中占比（10.7%；p＜0.00001）（表3）。女性患者ZnT8 Ab的濃度高于男性患者（女性=122.5 UI/mL，男性=51.38 UI/mL；p<0.05）（圖1a）。然而，其他抗體（ICA、GAD Ab、IA2 Ab、IAA）的陽性占比在男性和女性之間無顯著差異。
表3 160例阿爾及利亞1型糖尿病患者中ZnT8 Ab相關因素
圖1 a：根據性別繪制ZnT8 Ab濃度的均值圖 b：根據血緣關系（是否近親結婚所生）繪制ZnT8 Ab濃度的均值圖。No:父母無血緣關系的患者；Yes:父母有血緣關系的患者。
2）年齡
根據年齡，患者被分為了3個組：
第一組：小于10歲（兒童）
第二組：10歲-18歲（青少年）
第三組：大于18歲（青年）
IA2 Ab、ZnT8 Ab在青少年和兒童中的檢出率顯著高于青年。GAD Ab、IAA、ICA在3組中的檢出率接近。
ZnT8 Ab陽性患者的平均年齡為12.24歲，ZnT8 Ab陰性患者的平均年齡為16.67歲(p<0.0001)(表3)。年齡小的患者中ZnT8 Ab濃度較高(p＜0.00001)（圖2a）。
圖2 各因素與ZnT8 Ab平均水平(UI/mL)間的關系：圖a:根據年齡(歲); b:根據體重指數(kg/m2);c:根據出生體重(g);d:根據空腹血糖水平(g/L);e:根據糖化血紅蛋白水平。
3）糖尿病病程
根據糖尿病病程，患者被分為3組：
第一組：病程小于2年
第二組：病程3-10年
第三組：病程大于10年
觀察到抗體的檢出率有顯著的時間依賴性衰減：第一組抗體檢出率89.18%；第二組抗體檢出率84.84%；第三組抗體檢出率25%（p=0.01）。
4）近親結婚
父母是近親的患者中GAD Ab、ZnT8 Ab和ICA檢出率更高。由圖1b可知，父母為近親的患者中ZnT8 Ab的濃度也顯著更高（199.31 UI/mL vs 61.88 UI/mL，p<0.01）。
5）喂養方式
6月齡以下的人工喂養患兒與母乳喂養患兒相比，ZnT8 Ab檢出率更高(p<0.01)，但濃度無顯著差異(p = 0.823)(表3)。其他抗體在患者出生時喂養方式上無顯著差異。
6）身體質量指數（BMI）
所有抗體陽性檢出率與BMI無相關性(表3)；而在低BMI患者中，GAD Ab、IA2 Ab、IAA、ZnT8 Ab的濃度顯著較高(圖2b)。
7）出生體重
所有抗體陽性檢出率在出生體重上無顯著性差異(表3)。
8）空腹血糖（FBG）
ZnT8 Ab陽性患者中空腹血糖水平更高，高ZnT8 Ab濃度水平患者中空腹血糖水平更高（表3和圖2d）。
9）糖化血糖蛋白（HbA1c）
ZnT8 Ab抗體水平在高HbA1c水平患者中更高 (圖2e)。
10）其他因素
對家族病史和相關的自身免疫性疾病進行研究，沒有觀察到與自身抗體的相關性。
討論
自身抗體是低體重患者鑒別診斷T1DM有效的工具[17]。在本研究隊列中，在91.25%的患者中至少發現了一種抗體，這與先前的研究一致，證實在80%至90%的T1DM患者中至少存在一種自身抗體[20,21]。抗體陰性的患者占8.75%。既往研究中抗體陰性的糖尿病發病率為4% - 10%[22]。
在本研究隊列中，ZnT8 Ab在小于35歲T1DM中的檢出率為46.25%。遺傳和環境因素可能導致T1DM在人群中的發病率和臨床特征不同[5]。一項中國的研究顯示年齡在1 - 70歲的新發T1DM患者中ZnT8 Ab的檢出率為24%，HLA基因型或其他種族間遺傳標記的差異、納入患者年齡范圍大被認為是這一低檢出率的可能原因[14]。同樣，一項來自巴西的研究招募了年齡在19 - 32歲T1DM人群，發現24%的ZnT8 Ab陽性[15]。在5 - 34歲的急性發病的日本T1DM患者中和1 - 18歲的土耳其T1DM患者中ZnT8 Ab陽性率為58%[24]。
在本研究28例GAD Ab、IA2 Ab、IAA和ICA評估結果陰性患者中，50%（14例）患者檢測出ZnT8 Ab陽性。該結果與Tihamar等人[25]的研究一致。增加ZnT8 Ab的檢測，使在本隊列中自身抗體陰性受試者的比例從17.5%降低到8.75%。在另一項研究中，自身抗體陰性受試者的比例從6%降低到小于2%[26]。
本研究還表明，ZnT8 Ab在年輕（≤18歲）患者中檢出率更高，ZnT8 Ab濃度水平更高。這與Brasil Gomes等人的研究一致，他們的結論是ZnT8 Ab是1型糖尿病，特別是在年輕患者疾病診斷中的有效標志物 [37]。
本研究中關注到母乳喂養與自身抗體缺乏之間的相關性，ZnT8 Ab在人工喂養的患者中更常見。這與瑞典的一項研究相一致，該研究證明，長期純母乳喂養的兒童患1型糖尿病的風險可能低于其他非母乳喂養兒童[44-46]。
結論
本研究是初次對阿爾及利亞T1DM患者進行ZnT8 Ab研究，得到ZnT8 Ab檢出率為46.25%。ZnT8 Ab陽性能將50%的常見糖尿病相關自身抗體陰性的糖尿病患者進行準確識別，表明ZnT8 Ab是1型糖尿病鑒別診斷的良好工具。
原文：Boudiaf A L , Bouziane D , Smara M , et al. Could ZnT8 antibodies replace ICA, GAD, IA2 and insulin antibodies in the diagnosis of type 1 diabetes?[J]. Current Research in Translational Medicine, 2018, 66(1).
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